PROBLEMA DE PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS POR CROMATOGRAFÍA SE SOLICITA

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Problema de purificación de proteínas por cromatografía

Problema de purificación de proteínas por cromatografía

Se solicita a un grupo de estudiantes la purificación de una mezcla que contiene 5 componentes, usando SOLO la cromatografía, claro que se pueden usar varios pasos secuenciales con los materiales que se proporcionan abajo. Los componentes y sus propiedades se encuentran en la tabla 1. Debido a que los componentes presentan color los estudiantes verán como se separa cada uno de los componentes.

Tabla 1. Propiedades de los componentes en la mezcla

Compuesto	Color	Peso molecular (Da)	Carácter iónico a pH 6
Azul dextran	Azul	>500,000	Anión muy fuerte
Amarillo dextran	Amarillo	40,000	Anión fuerte
Citocromo c	Naranja-Rojo	12,400	Anión fuerte
Vitamina B12	Rosa	1,357	Catión débil
*DNP-glicina	Amarillo	241	Catión débil

*DNP es dinitrofenil

Materiales.

Resinas (3):

Carboximetil (CM)-sefadex G25,
Dietilaminoetil (DEAE)-celulosa,
Sefadex-G25.

Amortiguadores:

1 M Acetato de potasio pH 6.0;
M Acetato de potasio pH 6.0
2M HCl.
Y la disponibilidad de diluirlas si así lo desean.

Investiguen que propiedades tienen las resinas que se les proporcionaron
Propongan el protocolo de purificación.
Expliquen el porqué de cada paso de la secuencia del protocolo en A).

1 EL PROBLEMA DEL AGUA 3 MIEMBROS 1 EL
1 PROBLEMAS DE CONDENSADORES 1 SI TENEMOS VARIOS
1 RECURSOS DE EXPRESSÃO 1 PROBLEMATIZAÇÃO O SÉCULO XXI

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